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    B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞
    更新時間:2020-06-22 點擊量:2071

      細胞信息表

     

    細胞名稱          B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞

    種屬            絨猴

    組織來源          外周血

    生長狀態(tài)          懸浮細胞

    培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型:RPMI1640培養(yǎng)基

                  FBS:10%

                  抗生素:雙抗

                  培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5%

     

    傳代方法 收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài):

    如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮

    培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

    如果細胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

    貼壁細胞傳代方法:

    1棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

    2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸

    后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時觀察細胞狀態(tài)變化,待細胞大部分變

    圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

    懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。

    1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,

    吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

    2離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),1000rpm, 5分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

     一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。

    凍存方法 

    70%*培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

    儲存:液氮中長期保存。

    1觀察細胞hao在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。

    2在運輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

    3收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等,請在一周內(nèi)與我們聯(lián)系。

     

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