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    土壤脫氫酶試劑盒檢測說明書
    更新時間:2021-05-09 點擊量:1691

    規格:100 /48 

    土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)試劑盒說明書

    微量法

    注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

    測定意義:

    土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內活性微生物量以及其對有機物的降解活性,可以作為土壤微生物的降解性能指標。

    測定原理:

    氫受體 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC) 在細胞呼吸過程中接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TFTF 呈現紅色,在波長 485nm 處有最大吸收峰,采用分光光度法于 485nm 測定其吸光值,即得土壤脫氫酶活性。

    自備實驗儀器及用品:

    篩子、天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、冰、蒸餾水、丙酮(不允許快遞,請用戶自備

    試劑的組成和配制:

    試劑一:粉劑×1 瓶,使用前加 5mL 水溶解,4℃避光保存(盡量現配現用試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:丙酮,自備。

    樣品處理:

    1. 土壤樣品:準確稱取過 40 目篩的新鮮土壤樣品約 0.1g以保證 TTC 與土壤顆粒充分接觸

    2. 污泥樣品:污泥用蒸餾水洗滌,10000g,25℃,離心 10min,棄上清,反復 3-4 次。

    測定步驟和操作表:

    1、分光光度計/酶標儀預熱 0min,調節波長至 485nm。

    2、操作表

     

    對照管

    測定管

    樣品(g)

    0.05

    0.05

    試劑一(mL)

     

    0.1

    試劑二(mL)

    0.2

    0.1

    置于 EP 管中,充分混勻,37℃,暗培養 6h,取出后立即冰浴 5min

    試劑三(mL)

    0.1

    0.1

    反復震蕩數次,37℃保溫 10min,10000g,4℃,離心 5min,取 200μL 上清于微量石英比色皿/96 孔板,對照管調零,測定 A 485 。

    脫氫酶活力計算:

    酶活單位定義:

    37℃時,每克樣品每小時使反應體系 OD 值每增加 0.01 為一個酶活單位。計算公式:脫氫酶活性(U/g)=A 485 ÷0.01÷T÷W= 16.67×A 485 ÷W

    T:培養時間,h;W:樣品質量,g

    注意事項:

    1. 配制好的試劑一避光保存于 4℃,最好在一周內使用,若出現紅色,則不能使用。

    2. 試劑三易揮發,有毒,為了您的健康,請穿實驗服,戴口zhao,戴乳膠手套操作。

    3. 反應完成后立即冰浴以終止反應,并去除干凈殘留的反應液。

    4. 如果測定出來的吸光值較大,減少樣品用量再進行測定。

    5. 試劑盒 2-8℃保存。

     

    實驗代做服務:

    ELISA試劑盒免費代檢測

    CCK8檢測

    HE染色

    蛋白相互作用分析

    Western Blot

    免疫組化IHC染色

    熒光定量PCR

    動物模型服務

    流式細胞檢測

    免疫熒光染色

    激光共聚焦

    DNA甲基化實驗

    石蠟/冰凍切片

    透射電鏡服務

    掃描電鏡實驗

    蛋白雙向(2-D)

    動物實驗

    免疫共沉淀

    原位雜交(FIsh

    蛋白質純化

    分子克隆和質粒載體構建服務

    組蛋白甲基化磷酸化乙酰化

     

    蛋白雙向2D-WB

     

    藥理毒理動物實驗

     

    番紅O固綠染色

    明膠酶譜MMP

    酶活性檢測

    動物造模/模型實驗服務

    滬公網安備 31011802001677號

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